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#30340;、大小不等的DNA重复序列,凝胶上呈现典型的梯型电泳条带.检测结果如图1所示.由图1可知,PCR检测鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028的检出限为2×103CFU/mL,而PMA-LAMP检测鼠伤寒沙门氏菌ATCC14028的检出限为2×10CFU/mL.

2.2PMA-LAMP检测方法的特异性

4株沙门氏菌均呈阳性反应,其他5株非沙门氏菌（为大肠埃希氏菌ATCC25922、福氏志贺菌CMCC6120513、金黄色葡萄球菌CMCC26003、单核细胞增生李斯特菌CMCC（B）54002-5、创伤弧菌ATCC27562均为阴性（图2）.由图2可知,按照方法“1.4.3”的扩增体系,62℃温育45min,4株沙门氏菌在凝胶上呈现典型的梯型电泳条带,5株非沙门氏菌均为阴性,去离子水作为阴性对照,通过琼脂糖凝胶电泳无扩增条带.

2.3人工污染克氏螯虾样品中沙门氏菌检测结果

将检测无沙门氏菌污染的克氏螯虾样品按GB/T4789.4-2008方法制备样品,菌悬液浓度依次为2×105、2×104、2×103、2×102CFU/mL,于（36±1）℃培养18～24h后分别按照国家标准方法、PCR检测方法及PMA-LAMP检测方法进行检测（表2）.由表2可知,国家标准方法与PMA-LAMP检测方法的检测结果一致.PCR检测方法的最低检出限高于国家标准方法和PMA-LAMP检测方法.

2.4克氏螯虾样品的检测结果

采集60份市售的克氏螯虾样品,PMA-LAMP检测方法检出6例沙门氏菌,阳性率为10%；PCR检测方法检出4例沙门氏菌,阳性率为6.7%；国家标准方法检出4例沙门氏菌,阳性率为6.7%.PMA-LAMP检测方法与国家标准方法的阳性率差异不显著性,并且比国家标准方法的检出限低.

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3结论

湖北省是水产养殖大省,近年来湖北省大力发展克氏螯虾养殖,其年平均产值达20亿元以上.克氏螯虾养殖主要集中在水稻田、池塘、沟渠等地,受养殖环境的影响,克氏螯虾体内可能会寄生多种病原微生物,由此容易引发食源性病原微生物问题.因此在养殖环节建立食源性病原微生物监测体系,对食源性病原微生物做到早检测早预防.目前LAMP技术已被应用于食源性病原微生物的快速检测,与传统的快速检测方法相比较,PMA-LAMP检测方法具有检测快速、操作简便、灵敏度高、特异性强、成本较低、不需要精密仪器的优点,特别适合现场快速检测的需求.本研究建立了快速检测克氏螯虾沙门氏菌PMA-LAMP检测技术,应用PMA-LAMP检测方法检测克氏螯虾样品中沙门氏菌,与国家标准检测方法比对,两种方法检测结果相同,可为食品安全快速检测提供一种新的思路,PMA-LAMP检测方法具有快速、灵敏度高、操作简便等优点,并能检测鉴定沙门氏菌病原活细胞[6,9].参考文献：

[1]JACOBSENCS,HOLBENWE.QuantificationofmRNAinSalmonellaspp.seededsoilandchickenmanureusingmagiccapturehybridizationRT-PCR[J].JournalofMedicalMicrobiology,2007,69（2）：315-321.

[2]KANEKOH,KAWANAT,FUKUSHIMAE,et,al.Toleranceofloopmediatedisothermalamplificationtoaculturemediumandbiologicalsubstances[J].JournalofBiochemicalandBiophysicalMethods,2007,70（3）：499-501.

[3]LIX,ZHANGS,ZHANGH,ZHANGL,etal.Aloop-mediatedisothermalamplificationmethodtargetsthephoPgeneforthedetectionofSalmonellainfoodsamples[J].InternationalJournalofFoodMicrobiology,2009,133（3）：252-258.

[4]MALORNYB,BUNGEC,HELMUTHR.Areal-timePCRforthedetectionofSalmonellaEnteritidisinpoultrymeatandconsumptioneggs[J].JournalofMedicalMicrobiology,2007,70（2）：245-251.

[5]NOVINSCAKA,SURETTEC,FILIONM.QuantificationofSalmonellaspp.inpostedbiosolidsusingaTaqManqPCRassay[J].JournalofMedicalMicrobiology,2007,70（1）：119-126.

[6]鲁玉侠,郭祀远,石磊,等.PMA-LAMP方法快速检测死/活的食源性沙门氏菌[J].食品科学,2009,30（22）：324-327.

[7]SAROJSD,SHASHIDHARR,KARANI.Rapid,sensitiveandvalidatedmethodfordetectionofSalmonellainfoodbyanenrichmentbrothculture-nestedPCRbinationassay[J].MolecularandCellularProbes,2008,22（3）：201-206.

[8]NAGAMINEK,HASET,NOTOMIT.Acceleratedreactionbyloopmediatedisothermalamplificationusingloopprimers[J].MolecularandCellularProbes,2002,16（3）：223-229.

[9]张毅,王爱