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衣剂在一段时间内可以有效控制青枯病病害.农用链霉素是目前生产上防治烟草青枯病最常用的一种药剂,其有效成分就是灰链霉菌的发酵产物.1.1.3.4其它生防因子的应用
除芽孢杆菌,假单杆菌和放线菌三大类微生物外,国内外学者也曾尝试将其它微生物和植物提取物用于植物青枯病的防治.黎起秦等[]筛选到一株哈茨木霉对番茄青枯病的防治在室内取得了较好的效果.印度ures等[]学者发现受泡囊丛枝状菌(Vesieles-ArbuseulesMyeorrhizae,VAM)感染的番茄根围菌根提取物可抑制青枯雷尔氏菌的生长.朱红惠等[]发现AM真菌可以抑制青枯病菌,影响土壤中青枯菌和其它细菌数量,对番茄苗有较好的延缓青枯病发生的能力.某些植物提取物也对青枯病菌有抑制作用,如山苍子,大蒜,黄茂提取物对烟草青枯病菌有明显的抑制作用[6566].
虽然对青枯病生防菌的筛选以及防效研究是国内外学者研究的热点,也有不少关于青枯病生防菌的报道,在实验室内或小区试验中均有很好的抑制作用,受多种因素的制约,目前为止生防产品由实验室向大田推广应用的并不多,且生防制剂多为活菌制剂.目前生防菌田间的作用体系,作用方式尚未明了,而且田间应用时容易受到土壤微生物,土壤性质,外界温湿度等[-43]多种因素影响,从而无法控制其田间防治效果导致各区域防效差异显着.因此,加强生防菌作用机制的研究,探索生防菌在施用环境中与病原菌,植物的互作机制是有效发挥生防菌作用效果的重要途径.
1.2番茄青枯病生物防治机制的研究
1.2.1生防菌定殖的研究进展判断筛选的生防菌株生防能力如何,最重要的是其能否在寄主植物根围及植株体内定殖.目前有大量青枯病病原菌及无致病力菌株在植株定殖分布的文章,如王铮敏等[]研究了不同发病期茄子植株体内青枯菌的分布刘波,朱育菁等[]研究了青枯雷尔氏菌在植株体内分布及其致病力的异质性,表明青枯雷尔氏菌能在植株体内定殖.杨宇红等[]构建工程菌无致病力青枯雷尔氏菌hrP突变体主要通过位点和营养竞争影响青枯致病菌在寄主上的附着或营养的摄取,从而起到控病的作用.杨威等[]对细菌定殖能力与其生物防治功能相关性研究进展做了详细介绍,吕建林等[]研究了烟草青枯病生防菌混合接种对其定殖及防效的影响.任欣正等[41]发现无致病力青枯雷尔氏菌菌株noE-104能在番茄植株根部定殖,并对致病菌在根部的增殖有抑制作用,说明该菌对青枯病的防治作用和无致病菌占据了一定的定殖位点有关.朱育菁等[]研究了青枯强致病力与无致病力菌株生长竞争关系,无致病菌株在一定时间内具有高于强致病力菌的生长能力,当与强致病力菌混合时,能较快成为优势种群.扫描电镜激光共聚焦显微镜荧光显微镜[50]利用绿色荧光蛋白Olivain[51]利用激光共聚焦显微镜AnastasiaL等[52]利用扫描电镜等技术研究了生防菌在植株中的定殖状况.传统的稀释涂板法,因操作简单,方便目前也被广泛应用于检测具有特殊标记的生防菌的定殖特性.
1.2.2生防菌对植株防御酶系统的研究进展
氧化物酶POD),超氧化物歧化酶SOD),多酚氧化酶PPO)是形成多种抗菌作用物质的关键酶,也是植株防御系统的重要组成物质.许多研究结果表明,无论是真菌,细菌,病毒或是它们的代谢产物,糖蛋白,毒素等都可作为诱导因子,诱导植物产生抗性,与植物抗病性有关的酶如PODSOD,PPO的活性均有显着增加.SOD,POD,PPO,苯丙氨酸氨裂解酶PAL),脂肪酸氧化酶LOX)等均通过不同的方式直接或间接参与植株防御酶系统[3-57].Keppler等[8]研究发现,O2一POD不仅参与了木质素的沉积过程,而且在清除H2O2和O2一自由基方面具有重要防御作用.SOD在,它可以清除O2一以避免对细胞的伤害.PPO是细胞抗性酶之一,其作用机制是将细胞代谢产物中的酚类物质氧化为醌类来杀死细胞限制病原物进一步扩展.
植物对外界环境变化敏感,在紫外线辐射,微量元素施肥,重金属及微生物所产生的压力下,容易产生对细胞有毒害作用的活性氧成分activatedoxygenspecies,AOS[59-63].植物通过自身代谢机制分解这些活性氧成分.抗氧化酶系统在分解AOS中具有重要作用,包括可以催化O2一形成H2O2的SOD和去除H2O2毒性的POD以及PPO等,这些酶以多种形式存在于植物组织中,从而使植物免受AOS氧化作用而产生损害前人的大量研究表明,干旱,水涝,植物病原微生物以及内生菌[4-66]等可提高植株不同部位抗氧化酶如SOD,POD,PPO等酶的活性.植物疫苗和番茄植株的,为植物疫苗的开发应用提供理论依据.1.2.3生防菌定殖土壤微生态的研究
根际微生态是由植物-土壤-微生物组成的一个动态变化的生态系统[7].受到多种因素的影响.生防菌能否很好的定殖于植物根际土壤,根系微生物种群结构作物产量根际微生物能否达到平衡状态,是生菌防治土传病害重要因子.
所有生物活细胞膜磷脂不同微生物具有不同的PLFA的种类和数量,一些脂肪酸只特异性地存在于某种微生物细胞膜中[8].微生物磷脂脂肪酸组成与含量具有种属的特异性,由于存在于活体微生物细胞膜的磷脂脂肪酸分布广泛且含量相对稳定,对环境的变化敏感,分析方法简单,因此,PLFAs技术被广泛应用于土壤微生物学研究.目前,脂肪酸生物标记[69].IbekweAM等[70]用脂肪酸生物标记法MerrySR等[71]利用PLFAs技术PLFAs技术与传统稀释涂板法,氯仿熏蒸法和BIOLOG分析相比,手段.
1.2.4根系提取液对生防菌的研究
根系作为一种连接土壤和植物的重要媒介,对植物的生长起到了非常重要的作用.目前利用根系提取液及根分泌物防治病原菌的防治有广泛的报道,范志宏等[]研究了万寿菊根提取物对西瓜枯萎病菌的抑菌活性成分及作用机理,李勇等[]研究了根系分泌物及其对植物根际土壤微生态环境的影响.利用有关植物提取物同病原菌作用的研究的报道局限在对植物根,茎,叶及根分泌物的成分分析上,尚未见对不同植物根系提取液作用的报告[-76].根系提取液是在研究根提取液的基础上,对植物的根分泌物及土壤中的物质成分的研究,这对研究植物同病原菌的关系有更为广泛的意义.
1.3番茄青枯病植物疫苗研究及其应用前景
利用无致病力细菌素产生菌防治细菌性青枯病是七十年代末开始尝试的防法,近年来广泛受到植物病理学研究者的重视.而植物疫苗是最近几年才提出的,前研究认为植物没有循环系统,就没有疫苗.但是经过研究发现植物体内也有水分和养料循环系统植物在感受外界后调整内部的能力给植物产生抗,排除其他细菌入侵,达到防治病菌的效果植物疫苗.植物体内细菌生物竞争方式养分生态位占领.病原菌分化,在菌的分化中找到无致病菌,先植物体内,其他菌进的可能性.但无致病菌是多样性的,植物疫苗和动物疫苗,动物疫苗进入动物体内后会自动复制但是植物疫苗无致病的原理研究一种长期存在植物体内的无致病菌株,.LumK.Y.[],TsaiJ.W.[],A.Trigalet[]等均先后报道了利用无致病力细菌素产生菌对植物青枯病防治的研究.台湾Chen[]用无致病力青枯雷尔氏菌121菌株,Hara[81]用无致病力青枯雷尔氏菌OM2菌株任欣正等[]用无致病力青枯雷尔氏菌菌株MA-7和nOE-104防治番茄青枯病,均取得温室或小区试验的良好防效,但后期防效降低,大田试验均未能取得较好效果,这可能主要由于无致病力青枯雷尔氏菌菌株在大田土壤中不能大量繁殖,缺乏与其它微生物的竞争力所致.王羽等[]从有青枯病的番茄茎中分离出
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