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对肌条的收缩有明显的兴奋效应,与对照组比较差别有意义(1.±0.07vs1.00±0.01,P<,0.05).
2.1.2近端结肠肌条与对照组比较,1×10-8mol/LBDNF肌条的收缩R值从1.00±0.0增加到1.±0.03(P>,0.05),但差异无统计学意义.1×10-7mol/LBDNF肌条的收缩R值从1.00±0.0增加到1.3±0.06(P>,0.05),见图2.
远端结肠肌条与对照组比较,1×10-8-1×10-7mol/LBDNF(1.9±0.04vs1.00±0.02,P>,0.05).1×10-7mol/LBDNF对肌条的收缩有明显的兴奋效应,与对照组比较差别有意义(1.±0.05vs1.00±0.02,P<,0.05).
图1BDNF(1×10-7mol/L)加入前,后小鼠回肠,近端结肠和远端结肠平滑肌肌条收缩活动的实时记录曲线.
A:回肠,B:近端结肠,C:远端结肠.
Fig.1Real-timedepictedcurvesofthelongitudinalmuscle(LM)stripcontractionofileum,proximalcolonanddistalcolonbeforeandafterBDNFwasadministrated(1×10-7mol/L).
A:Ileum,B:Proximalcolon,C:Distalcolon.
图2BDNF对小鼠回肠,近端结肠和远端结肠平滑肌肌条收缩兴奋效应的量效曲线.*P<,0.05vs对照组.
Fig.2SummarydataoftheexcitatoryeffectofBDNFonileum,proximalcolonanddistalcolonLMstrips.
*P<,0.05vsthecontrolgroup.
表1小鼠回肠及结肠对BDNF反应的张力效应值(R)
BDNF浓度(mol/L)1.00±0.011.00±0.011.00±0.021×10-81.06±0.031.07±0.031.09±0.041×10-71.29±0.07*1.33±0.06*1.39±0.05**P<,0.05vs对照组.
2.2TrkB-PLC/IP3信号通路对BDNF兴奋肌条效应的影响TrkB抗体组预先给予TrkB抗体(1×10-8mol/L)孵育回肠和远端结肠平滑肌肌条60min,再加入BDNF(1×10-7mol/L),肌条收缩张力效应值分别1.02±0.03(回肠肌条)和1.0±0.03(远端结肠肌条),与单独应用BDNF(1×10-7mol/L)后的R值(回肠肌条1.±0.07,远端结肠肌条1.±0.05),差有统计学意义(P<,0.05).
PLC阻滞剂新霉素组预先给予新霉素(1×10-5mol/L)孵育回肠和远端结肠平滑肌肌条20min,再加入BDNF(1×10-7mol/L),肌条收缩张力效应值分别1.04±0.05(回肠肌条)和1.0±0.04(远端结肠肌条),与单独应用BDNF(1×10-7mol/L)后的R值(同上),差有统计学意义(P<,0.05).
IP3阻滞剂肝素组预先给予肝素(1×10-5mol/L)孵育回肠和远端结肠平滑肌肌条20min,再加入BDNF(1×10-7mol/L),肌条收缩张力效应值分别1.05±0.04(回肠肌条)和1.0±0.05(远端结肠肌条),与单独应用BDNF(1×10-7mol/L)后的R值(同上),差有统计学意义(P<,0.05).新霉素BDNF(1×10-7mol/L)兴奋*P<,0.05vs单独应用BDNF(1×10-7mol/L)组.
Fig.3TheroleofTrkB-Ab,neomycinandheparinintheexcitatoryeffectofBDNF(1×10-7mol/L)ontheLMstripsofileumanddistalcoloninmice.
A:Ileum,B:Distalcolon.*P<,0.05vsthegrouptreatedonlywithBDNF(1×10-7mol/L).
3讨论
BDNF广泛分布于中枢和外周神经系统,在神经元分化,发育,存活中发挥重要作用.近来研究发现,BDNF不仅在神经系统而且在肠道各层亦有大量表达,包括肠神经系统,肠膜上皮和肠肌层,并有研究显示其在肠道的表达量甚至超过在脑中的表达量[-7],提示BDNF在肠道发挥着重要的生理调节功能.已有研究证实BDNF在肠神经元可塑性调节及肠道感觉调节中发挥重要作用[-10],但关于BDNF在肠动力调节方面的.
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对1000余例各种神经紊乱患者应用重组人类脑源性神经营养因子r-metHuBDNF)进行治疗,发现其对肠道运动功能有加速作用,所有患者均出现了剂量依赖性腹泻的副作用,在对肌萎缩性侧索硬化症患者应用r-metHuBDNF进行治疗时,患者也出现了腹泻的症状[],提示r-metHuBDNF可使大便在结肠通过时问缩短,大便次数增加.Coulie等[]在人体研究发现,r-metHuBDNF可以加快健康人群结肠运输功能,增加大便次数.Wellmer等[]在对糖尿病多发神经病患者应用r-metHuBDNF治疗时,发现患者的肠道运动功能增强.Grider等[1]研究发现BDNF可以增强由膜刺激引起的大鼠离体结肠蠕动反射,而BDNF+/-小鼠结肠的蠕动反射明显减弱研究发现BDNF明显增强大鼠肠道平滑肌的肌电活动[1].以上研究均说明BDNF在调节肠动力方面发挥了重要作用但BDNF对肠道平滑肌收缩的具体调节作用及其机制报道.
本篇论文出处 http://www.sxsky.net/xie/07085199.html
本研究检测不同浓度BDNF对肠道肌条收缩活动的影响,结果显示BDNF增加小鼠回肠,近端结肠和远端结肠肌条的收缩幅度表明BDNF可以兴奋回肠和结肠平滑肌肌条的收缩活性,发挥促进肠道动力作用与前述的BDNF促进人和大鼠肠道动力作用的研究结果一致.
目前关于BDNF促进肠道动力作用的潜在机制尚未阐明.在中枢神经系统,BDNF与TrkB受体结合后,受体分子二聚化,其多个酪氨酸残基快速自动磷酸化,这些活化的蛋白质可以通过激活三种信号通路来发挥其生物学功能.其中TrkB-P/Akt及TrkB-MEK/MAPK信号通路主要在神经元的分化,发育,存活和突触可塑性调节方面发挥作用[13-15].TrkB-PLC/IP3信号,可使胞内的钙离子浓度升高,升高的钙离子与其相应的受体结合进而引起下游的系列反应突触囊泡的释放离子通道的开放等从而发挥生物学效应例如参与LTP的形成[1],调节各型离子通道增强神经肌肉接头突触兴奋性神经传导[].Boesmans等[1]研究发现,TrkB受体向培养的鼠肠肌间神经丛加入外源性BDNF,发现可以增强突触囊泡簇的密度并且易化突触囊泡内兴奋性神经递质的释放,增强由5-TH和SP引起的肠神经元内Ca2+流量BDNF在肠神经系统TrkB-PLC/IP3信号发挥重要的动力调节作用.本研究TrkB抗体TrkB-PLC/IP3信号,检测BDNF(1×10-7mol/L)引起的的肠道肌条收缩活动的影响,明显BDNF(1×10-7mol/L)对小鼠回肠和远端结肠肌条收缩的兴奋作用.本研究结果表明TrkB-PLC/IP3信号综上所述,本实验验证了BDNF对小鼠肠道肌条的兴奋作用,发现TrkB-PLC/IP3信号通路阻滞剂可明显减弱BDNF对肠道肌条的兴奋作用表明BDNF及其下游的TrkB-PLC/IP3信号通路在促进肠动力过程中发挥着不可或缺的作用.随着对BDNF促肠动力机制研究的深入,BDNF.TheBDNFStudyGroup.AcontrolledtrialofrebinantmethionylhumanBDNFinALS:theBDNFStudyGroup(phaseIII)[J].Neurology,1999,52(7):1427-1433.
[2]CoulieB,SzarkaLA,CamilleriM,etal.Rebinanthumanneurotrophicfactorsacceleratecolonictransitandrelieveconstipationinhumans[J].Gastroenterology,2000,119(1):41-50.
[3]WellmerA,MisraVP,ShariefMK,etal.Adouble-blindplacebo-controlledclinicaltrialofreb
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