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关于瘢痕方面论文范文参考文献,与瘢痕疙瘩p53基因检测试剂盒的临床应用相关毕业论文提纲

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单纯切除后易复发等特点.故一旦发生处理相当棘手,提前预测其可能发生的风险率则可大大减少瘢痕疙瘩的发生,对其诊断和治疗方面也有重要的临床意义和实用价值.近年来,遗传因素在许多疾病的发生中所起的重要作用备受重视,且已发现了多种易感基因的存在.p53基因即是目前较为关注的与瘢痕疙瘩疾病相关的基因之一.人类ｐ53基因定位于17q13.1,长约20Kb,由11个外显子和10个内含子组成,编码393个氨基酸,p53蛋白在细胞周期的调控、维持细胞基因组的完整性,诱导细胞分化和凋亡中起着重要的作用[3-4].近年研究发现p53基因第72位密码子Pro/Arg多态与某些肿瘤易感性有关.Fan[5]等报道携带Pro/Pro纯合基因型的美国白人患肺腺癌的风险增加1.45倍,Zehbe等[6]的研究证实Arg/Arg纯合基因型增加HPV感染宫颈癌的危险,最近,Kay等[7]报道p53基因第72位密码子多态性与体外受精和胚胎植入成功率相关.

3.2我们在前阶段发现p53基因第72密码子多态性与瘢痕疙瘩的发生存在关联关系,Pro/Pro基因型者患瘢痕疙瘩的相对风险性明显增高[8],并以此设计并装配成一套p53基因检测试剂盒用于预测瘢痕疙瘩高危个体[9],为检验试剂盒的有效性,我们通过对浙江地区75例瘢痕疙瘩患者p53基因第72位密码子多态性检测,发现Pro/Pro基因型人群患瘢痕疙瘩的危险度较Pro/Arg型和Arg/Arg型高,Pro/Pro基因型者患瘢痕疙瘩的相对风险性(OR)明显增高(OR等于2.404,95%CI:1.182～4.887).此结果与先前报道的结论大致相同[8],我们认为此试剂盒可重复性良好、易于保存、操作过程既快速又经济,适合在临床普及使用.

3.3在检测过程中应注意的问题

3.3.1杂交温度：反向点杂交的温度要求非常严格,应控制在42℃±0.5℃,否则就会影响杂交结果,杂交温度一般低于DNA的解链温度（T值）20℃～30℃,使用甲酰胺可降低T值,甲酰胺浓度增加1%,T值下降0.7℃,因此如果两种不同的探针同时杂交,可以考虑用甲酰胺来调整解链温度,使杂交顺利进行.

3.3.2杂交液的体积和杂交时间：杂交体系的体积小比大好,小体积有利于增加核酸与膜上探针杂合的机会,但也不能太小,太小也会影响探针的分子运动,与杂交不利,通常使用体积应在60～100μl/cm2膜.对于杂交时间,3～24h不等,对于常用的杂交方法,往往取决于所用探针的浓度和强度,越高,杂交需要的时间越短,但过高的探针浓度既浪费又会使本底增高.本试剂盒所用的生物素标记的探针含量通常控制在20～1000ng/ml杂交液.

[参考文献]

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[9]卓阳,高建华,罗深秋,等.瘢痕疙瘩p53基因检测试剂盒的研制[J].中华实验外科杂志,2005,22(6):761.

[收稿日期]2008-01-22[修回日期]2008-04-23

编辑/张惠娟

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