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化学发光方面论文范文例文,与两种透明质酸定量检测试剂的方法学对比相关论文查重软件
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【中图分类号】R575.2【文献标识码】A【文章编号】1672－3783(2011)10－0237－01
【摘 要】目的对比放射免疫法与化学发光法检测透明质酸的差异.方法根据美国临床实验室和标准化协会（CLSI）EP9-A2评价方案,将放射免疫法作为比较方法,化学发光法为实验方法,评价两种试剂的差异.结果：化学发光法与放免法两种试剂检测临床的差异不显著.结论化学发光法与放免法检测HA比较实验结果发现偏倚在允许范围.排除操作影响,存在个别差异的样本,可能与试剂方法学有一定关系.
【关 键 词】肝纤维化肝活检透明质酸(hyaluronicacid,HA）放射免疫法化学发光法
透明质酸（hyaluronicacid,HA）是肝纤维化诊断的一项重要指标.研究表明,血清内HA水平和肝纤维化程度呈正相关（P<0.01）［1］?.目前临床实验室检测HA的方法有放射免疫法、酶联免疫法和化学发光法.放射免疫法检测试剂出现较早,临床符合率高、价格便宜,但操作繁琐、有效期短,且存在放射污染,已逐渐不能满足临床是实验的要求；近几年,市场上出现了酶联免疫法和化学发光法检测试剂,其在操作、保质期和安全等方面均较放免法有明显优势,但未见报导不同检测方法的差异.我们根据美国临床实验室和标准化协会（CLSI）EP9-A2评价方案,将放射免疫法作为比较方法,化学发光法为实验方法,评价两种试剂的差异并进行偏差估计.?
一材料与方法
血清和质控：
1血清样品：新鲜人血清40份,郑州人民医院消化内科住院的慢性肝病患者31例,平均年龄46岁；体检人员9例,平均年龄44岁.新鲜人血清收集后分装,置于-80℃冰箱保存,保存时间不超过一周.
2质控品：厂家提供.
二比对方法和评价方法的材料
1比较方法的仪器和试剂：采用上海原子核研究所日环仪器一厂SN-682型放射免疫计数器,北京北方生物技术研究所透明质酸检测放免药盒.
2实验方法的仪器和试剂：安图实验仪器公司的LUMO化学发光检测仪,郑州安图绿科生物工程有限公司透明质酸化学发光法检测试剂.
三评价方法
验证精密度：每日测2批质控,实验间隔>2h,每个样本作双份测定,连续20d,对结果进行批内、批间、日间精密度评估；若总CV超过15%,停止评价,查找原因［2］.
验证线性范围：参照EP06A进行验证评价,以保证标本中HA含量在线性范围内,否则剔除标本重做［2］.
方法学比对：每天分析8个样本,按照1,2,3,4,5,6,7,8,8,7,6,5,4,3,2,1的样本顺序进行测定,持续5天,两种方法比对同时进行［3］.实验过程中,每个实验加做两个质控,并做重复,若出现失控,实验重做；如果少于50%标本的HA含量低于120ng/ml,则补做标本.统计计算参照EP09-A2进行.
三结果
1方法内离群点分析：两方法均未出现方法内的离群点.
2方法间离群点分析：第15份样本明显离群,该患者为肝硬化病人,经验证查明非操作失误导致,可能与方法学差异有关,因此补做一份标本,测定值如表2所示.
183.4182.9
3两方法间双份测定均值的散点图.见图1.
4两方法重复测定的均值之差-对比方法重复测定均值的偏差图.见图2.
5计算估计偏倚和其置信区间.见表3.
讨论
实验室准备用一个新的检测系统或方法进行病人标本测定前,应和原有的检测系统或者公认的参考方法一起检测一批病人样品,从测定结果间的差异了解新检测系统或方法引入后的偏倚,如果偏倚不大,或者偏倚在允许误差范围内,说明两种检测系统或方法对病人样品测定结果基本相符,新检测系统或方法不会对临床引入明显偏倚［2］.
肝纤维化是肝脏弥漫性的、过量的细胞外基质沉积,是细胞外基质沉积过多或降解不足的直接后果,并且肝纤维化是肝硬化的早期病理基础.目前常规肝功能试验无法诊断肝纤维化或早期肝硬化.肝活检为创伤性检查,不能判断肝纤维化的活动度,且难以动态观察［4］.肝纤维化程度越重,血清纤维化指标出现异常的可能性越大.因此.临床上检测肝纤维化血清标志物更有实用价值.肝病患者肝组织的炎症活动度与肝纤维化程度呈正相关,其中HA反映炎症程度较敏感.目
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HA由间质细胞合成,它反映肝脏纤维化活动程度和肝脏损伤程度,有研究显示HA是反映肝纤维化最具价值的血清学标志物［5］.研究亦证实血清肝纤维化指标与肝脏病理分级、分期呈正相关,肝纤维化指标水平越高,肝脏病理损害也较重.因此生化指标和肝组织病理学纤维化程度之间的相关性,有助于肝纤维化的非创伤性诊断.本研究结果显示,化学发光法检测HA与放免法比较,偏倚在允许范围.但是还是存在个别差异的样本,且排除操作影响,可能与试剂方法学有一定关系.
参考文献
［1］黄建民,蔡卫民.肝纤维化诊断中血清透明质酸检测的临床意义［J］.南京医科大学学报,1994,14(4):619-620
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［2］冯仁丰.临床检验质量管理技术基础［M］.3版.上海：上海科学技术文献出版社,2007:1
［3］张建忠,沈春燕.两检测测系统测定血清电解质的方法学对比与偏差评估［J］.现代医学杂志,2006,21(6):22-24
［4］马景德.肝纤维化的实验诊断进展［J］.实用医药杂志,2002,19:74
［5］陆伦根,曾德明.肝纤维化的诊断和评估［J］.中华肝脏病杂志2005,13:603~604
作者单位：450000河南郑州人民医院检验科
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