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【摘 要】目的酶联免疫吸附试验(TPELISA)检测方法的有效性进行综合分析,选择适合孕前优生筛查梅毒的方法.方法用TP、TPELISA方法对孕前优生进行梅毒筛查,阳性标本用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)方法确证.结果TP方法灵敏度39%,假阳性率4.3%,TPELISA方法灵敏度为94.74%,假阳性率为17.05%,漏检率为0.8%.结论TP、TPE

关于梅毒螺旋体实验室检测方法在优生健康检查中的结果的本科论文范文
梅毒方面论文范文集
LISA两种试剂作为孕前优生筛查梅毒的首选组合方案,更有利于优生优育,提高人口素质.

【关 键 词】梅毒检测TPELISATPPA

中图分类号:R446.6文献标识码:B文章编号:1005-0515(2011)7-430-02

近些年来,很多国家包括中国都有梅毒复燃流行的报道,提醒我们必须采取措施制止梅毒的蔓延.在梅毒快速诊断方面,世界卫生组织(WorldHealthOrganization,WHO)已经选择出一些具有高敏感性和特异性的试剂盒在全球范围推广.这些以重组抗原为基础的试剂盒在梅毒筛查中有望取代传统的筛查及确证试验,是未来大范围检测梅毒的高效检测手段

WHO认为优生优育比例下降因素之一是传染性因子未有效筛检,因此选用特异性强、灵敏度高的筛检方法和试剂对孕前优生意义重大.梅毒是严重危害人类健康的疾病之一,当前我国梅毒流行呈逐年上升的趋势,在一些高危人群中尤为严重.梅毒螺旋体侵入人体后,刺激机体产生针对螺旋体表面抗原的特异性抗体,而且还破坏机体组织产生抗磷脂的反应素即非特异性抗体.由于其特异性和敏感性存在着相对差异,因而不能满足筛选孕前优生的需要.而梅毒螺旋体抗原血清学试验如梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)法等大多为确证试验.近年来,针对梅毒螺旋体特异性抗体检测,建立了酶联免疫吸附试验(TPELISA)用于孕前优生检测.为了比较TP(胶体金法杭州艾康)、TPELISA、检测试剂的敏感性和特异性,采用上述两种试验方法筛查孕前优生血液,并对其中任一方法检测为阳性样本的血清再用TPPA方法进行鉴定.现将结果报告如下.

1材料与方法

1.1标本来源

选用在16017例次孕前优生筛查中产生的114例阳性标本以及由国家计生委科技司下设临床检验中心发放的室间质控血清.

1.2试剂

TP胶体金法(艾康生物技术杭州有限公司);ELISATpIgG试剂盒(北京万泰生物科技有限公司提供);;TPPA试剂盒(日本富士株式会社).

1.3仪器

酶标仪(采用深圳雷杜生命科学股份有限公司生产的RT-2100C)和洗板机(采用潍坊汉唐生物工程有限公司出产的X-9620).

1.4试验方法

同时采用TPELISA和TP两种方法对16017例次孕前优生标本进行梅毒筛检,若TP或ELISA任何一种试剂检测为阳性,若两种试剂均为阳性则用TPELISA试剂三孔复试,共筛检出阳性标本114例.各项试验操作均按试剂说明书进行,复试阳性标本用TPPA试剂确证.

2结果

2.1筛检结果

在114例筛检阳性标本中,TP胶体金法检出阳性45例,ELISA检出阳性108例,TPPA确认阳性105例.以TPPA确认试验作为判断标准,其中TP胶体金法只检测出45例阳性,ELISA检测出108例阳性,从两个结果中可看出,与TPPA确认试验相比较,TP方法灵敏度为39%,假阳性率4.3%,漏检率60.98%;而ELISA方法灵敏度为94.74%假阳性率为17.05%,漏检率0.8%.114例阳性标本TPELISA、TP、TPPA三种试剂检测结果

2.2用TP、TPPA、ELISA试剂分别对质控血清不同稀释倍数样本进行检出灵敏度测试

从以上三种检测方法对不同稀释倍数的血清测定结果看,ELISA方法灵敏度明显高于TP法.

3讨论

梅毒螺旋体梅毒亚种引起的梅毒是重要的性传播疾病之一,主要是通过性接触传播,但也可经输血感染、胎儿垂直传播.因此检测梅毒螺旋体抗体是预防传染性病的重要手段之一,梅毒的防治已成为十分重要的医学和社会问题.加强孕前优生者梅毒筛查工作,选择特异性好,灵敏度高的筛查试剂,对确保下一代的优生优育,提高人口素质具有重要的意义.


写梅毒本科论文的步骤
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从以上结果中可看出,TP方法灵敏度仅有39%,与临床报道有差异,表明临床患者与孕前优生体检人群血液中梅毒抗体浓度与性质存在不同,使用单一的TP试剂筛查孕前优生优育不安全;而TP假阳性率为4.3%,ELISA灵敏度为94.74%与唐跃华等报道接近[4].但ELISA方法假阳性率高达17.05%,高于相关报道,有待进一步探讨.从上述结果可看出,在全部97例确证阳性标本中,ELISA方法检出阳性108例,漏检3例,TP法检出阳性45例,漏检60例.所有漏检部分均被TP、ELISA方法相互检出,说明这两种试剂具有很强的互补性.这与试剂不同的抗原差异和灵敏度有关.

不难看出,TP检出灵敏度最低,造成阳性漏检,说明该试剂质量有待提高,而TPPA检出灵敏度也低于ELISA方法,表明存在方法学灵敏度的差异符合有关报道.ELISA、TP、TPPA三种方法,ELISA试剂的灵敏度优于TPPA,特异性优于TP,三种方法中TP法的特异性最差.三种方法在特异性、敏感性上有一定的差异,其原因主要是采用的抗原度方法不同.TP试验采用高度特异性的抗体抗原反应及免疫层析分析技术,试剂含有被预先固定于膜上测试区(T)的梅毒重组抗原和包被在金标垫上的梅毒重组抗原胶体金颗粒.TP-ELISA法采用的试剂是通过基因工程生产的重组抗原式多肽作为抗原.应用酶联免疫吸附试验(ELISA)将TP重组抗原包被在微孔板上测定血清中的特异性和灵敏度均符合国家的要求,其法检测的不单是血清中IgG、IgM抗体,还可以缩短窗口期,提高了对感染后的检出率,而且该法阳性还是已经治愈梅毒的“遗留表现”.TPPA是测定血清中梅毒螺旋体的特异性抗体,采用稀释血清和吸附抗原的方法,特异性较高,当然成本也相对较高,常作为梅毒确证试验;梅毒特异性抗体酶联免疫试剂作为新一代诊断试剂,采用高度纯化的重组梅毒螺旋体抗原,表达了梅毒螺旋体优势表位抗原连接后再进行克隆,表达的多表位嵌合抗原,避免了单片段抗原混合干扰,因此敏感性高,特异性强.

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可看出,经TPPA确认的82份阳性标本中,有1份为TP方法检出,而ELISA方法未能检出,说明ELISA方法尚不能完全取代TP方法,而且TP方法快速、简便,因此,目前采用此法进行梅毒检测还是必要的.ELISA方法是近年来采用的检测梅毒特异性抗体的方法,其存在假阳性的问题(17,.05%),但灵敏度高(94.74%),且与TPPA鉴定试验吻合度较高,因此采用此法进行血液的梅毒检测也是必要的,可行的.

综上所述,TP方法虽然易受人为因素影响,敏感性低,容易造成阳性漏检,但操作简便,出结果较快;TPELISA方法敏感性与特异性较之TP法均有所提高,有间接法,双抗原夹心法,适合大批量筛选.在TPPA确认的阳性标本中有35份标本是两种方法共同检出,其余标本或TP法阳性或ELISA法阳性.因此,笔者认为同时采用TP、ELISA两种方法组合筛查梅毒更有利于孕前优生质量的保证,质量成本也更为经济.

本站本着对孕前优生负责的态度,如果TP法和ELISA法检出均为阳性的可直接告之体检者,如果出现两种方法其中一种检出为阳性的标本则做TPPA确诊试验,实验结果方可告之体检者,这样可以使部分实验假阳性者减轻思想负担.

参考文献

[1]万德胜,郑和香,姚换娟.三种检测梅毒螺旋体血清学方法评估[J].热带医学杂志,2003,3:75-76.

[2]邹黎梅毒血清学试验几种检测方法比较[期刊论文]-实用医技杂志2006(21)

[3]江帆出生缺陷预防知识大全中国人口出版社2009:6:(1):27

[4]郑怀宽.免疫学检验室间质评与室内质控[M].北京:北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社,1997:137-

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