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摘 要：目的考察在反相色谱系统中,阴离子对试剂对有机弱碱盐保留时间的影响.方法选择了三种阴离子对试剂,分析了它们对三种有机弱碱盐保留时间的影响.结果阴离子对试剂碳链长度越长,弱碱盐的保留时间越长.合适的流动相pH值对于弱碱盐的峰形有很好的改善作用.结论实际工作中,应根据样品的类型,选择合适的离子对试剂及流动相pH值.

关 键 词：反相色谱；阴离子对试剂；有机弱碱盐；保留时间；pH值

在反相色谱系统中,有机弱碱盐通常在固定相上的保留值很小,保留时间很短,为了改善有机弱碱盐色谱峰的柱效,增加其在固定相上的保留值,通常会使用反相离子对色谱法分析有机弱碱盐类化合物.

反相离子对色谱法是把离子对试剂添加到极性流动相中,被分析的样品离子在流动相中与离子对试剂（反离子）生成不带电的中性离子对,从而增加了样品离子在非极性固定相中的溶解度,使分离系数增加,改善分离效果.

本文选择了三种有机弱碱盐：马来酸氯苯那敏、马来酸氨氯地平、氢溴酸东莨菪碱,分别用阴离子对试剂：庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、十二烷基硫酸钠对三种有机弱碱盐在反相系统中固定相上保留时间的影响进行了考察.

1仪器与试药

Waters高效液相色谱仪、Waters1525泵、Waters2487紫外可变波长检测器；WatersBreeze工作站.AG135电子天平,奥立龙868型酸度计.

乙睛为色谱纯,庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、十二烷基硫酸钠（赛智科技（杭州）有限公司色谱纯）为离子对试剂,磷酸为分析纯,水为纯化水.

马来酸氯苯那敏对照品（中国药品生物制品检定所,批号100047-200305）,马来酸氨氯地平对照品（中国药品生物制品检定所,批号100712-200401）,氢溴酸东莨菪碱对照品（中国药品生物制品检定所,批号100049-200308）.

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：DikxnaCl8（150mm×4.6mm,5μm）,流速：1.0ml/min；柱温：30℃；进样量20μl.

2.2溶液的配制称取适量的马来酸氯苯那敏、马来酸氨氯地平、氢溴酸东莨菪碱对照品,分别用实验用水配置成10ug/ml的对照品溶液.

2.3结果马来酸氯苯那敏、马来酸氨氯地平、氢溴酸东莨菪碱均为弱碱盐,在C18柱上几乎不被保留,所以采用一般的HPLC对它们进行分析有一定的难度,采用离子对色谱法增强它们在固定相上的保留,将大大优化色谱条件.我们参考有关文献[1-3]选择合适的检测波长及pH值条件,用三种不同的阴离子对试剂对以上三种弱碱盐在反相色谱系统中保留值的影响进行了考察,见图1～图10,表1.

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由以上色谱图及表1可以看出,阴离子对试剂对三种弱碱盐在反相色谱系统中的保留均是有贡献的,离子对试剂的碳链长度不同,疏水性也不同,离子对试剂的碳链越长,与弱碱盐所形成的离子对越易在固定相上保留；反之,碳链越短,离子对的保留值越小.

合适的流动相pH值也是离子对色谱的重要条件,它将决定离子化合物的解离度.使化合物有最大程度的解离,获得合适的保留与响应,但又不能超出硅胶基质的色谱柱所能承受的范围.

3讨论

流动相pH值、离子对试剂的碳链长度等因素对弱碱盐在反相色谱系统中的保留值影响明显,对弱碱类这些在水溶性溶液中易发生部分离子化的样品进行分离时,最简便的方法就是调节流动相的pH值,亦即对离子化过程进行促进,使得样品离子化完全,样品离子化完全后与流动相中的离子对试剂结合,从而增强样品在反相色谱系统中的保留值.在实际工作中,我们应根据弱酸、弱碱盐样品的不同来选择合适的离子对试剂与流动相pH值来改善样品的峰形,增加它们在固定相上的保留值.

参考文献：

[1]于敏,焦连庆,王帅.HPLC法测定鼻泰片中马来酸氯苯那敏的含量[J].中国药师,2010,13（10）：1530-1531

[2]陶宜富,钱方,娄晟,等.HPLC法测定马来酸氨氯地平分散片中主药及有关物质含量[J].中国药房,2010,12（17）：1597-1598

[3]周益芬,谢华,张悦杨.HPLC测定氢溴酸东莨菪碱的含量和有关物质&

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编辑/申磊

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