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[摘 要]中药生物药剂学分类系统（biopharmaceuticsclassificationsystemofChinesemateriamedica,CMMBCS）中的渗透性评价,需多成分作为整体来开展研究,即使在研究具体某一成分时,也应将其放在多成分环境中审视.该实验以此为原则,将葛根芩连汤中的高含量成分作为多成分环境影响因素,考察葛根素的肠渗透性,运用在体肠单向灌流模型,对葛根素肠渗透性的相关参数进行测定,评价其他高含量成分对其肠渗透性的影响.实验结果表明不同比例的黄芩苷、甘草酸和小檗碱对葛根素的肠渗透性均有一定的影响,甘草酸能显著抑制葛根素的肠吸收,高浓度小檗碱会促进葛根素的吸收.该研究结果表明中药生物药剂学分类系统的渗透性评价充分考虑多成分环境中其他成分的影响是重要的研究思想.
[关 键 词]葛根素,多成分环境,在体肠单向灌流,肠渗透性
[收稿日期]2014-07-18
[基金项目]国家自然科学基金项目（81473362）
[通信作者]*董玲,副研究员,硕士生导师,主要从事新剂型给药系统研究,Tel：（010）64286245,E-mail：dongling@bucm.edu.
[作者简介]刘洋,副教授,硕士生导师,主要从事药物代谢研究,Tel：（010）84738629,E-mail：liuyang@bucm.edu.
中药无论是单味药还是复方,均含有众多化学成分,多成分是中药制剂临床使用的基本特征[1].多数中药的临床作用是多成分被口服吸收后显现的,中药内含的某单一成分都处于受其他成分影响的多成分环境中,其吸收必定受到多成分环境的影响[2].目前文献中报道的中药单体成分渗透性研究较为多见[3],但以多成分为整体,研究某一成分渗透性时,充分考虑其他多成分影响的研究仍旧少见.而中药生物药剂学分类系统中用于分类的渗透性评价就应客观地在多成分环境中考察.目前美国FDA、欧盟EMA乃至中国CFDA,对多成分环境中单一成分的渗透性评价皆无规定.所以,本研究的目的是探索多成分环境对成分肠渗透性的影响,丰富CMMBCS的同时,也为药品管理部门提供参考.
化学成分的渗透性研究可采用体外Caco-2细胞模型[4]、间接体内尤金池实验[5]、人体[6]及动物在体肠灌流等技术开展.鉴于鼠小肠吸收与人类小肠吸收的相似性,及鼠小肠吸收模型所得的数据与人类小肠吸收的良好相关性[7-8],本实验采用大鼠进行
生物药剂学类论文例文
1材料
1.1仪器
Waters液相色谱系统（600四元泵,美国Waters公司）,2487双波长紫外检测器,Empower2工作站,BT-25S电子分析天平（北京赛多利斯仪器有限公司）,BT100-1F注射泵（保定兰格恒流泵有限公司）.
1.2药物与试剂
葛根素对照品（批号110752-200912,中国食品药品检定研究院）,葛根素原料（批号120504,陕西中鑫生物技术有限公司）,黄芩苷原料（批号ZL-A-018,南京泽朗医药科技有限公司）,盐酸小檗碱原料（批号120212,陕西中鑫生物技术有限公司）,甘草酸单铵原料（批号GU20120611,武汉金诺化工有限公司）.乙腈（色谱纯,美国Fisher）,娃哈哈纯净水购买于娃哈哈集团公司（中国杭州）,其他试剂均为分析纯.Krebs-Ringer′s营养液（K-R液）：称取NaCl7.8g,KCl0.35g,CaCl20.37g,NaHCO31.37g,NaH2PO40.32g,MgCl20.02g,葡萄糖1.4g,加去离子水定容至1000mL,即得.
1.3动物
Wistar大鼠,雄性,体重200～250g,北京维通利华试验动物技术有限公司提供,许可证号SCXK（京）2012-0001.
2方法
2.1溶液的配制
2.1.1对照品溶液制备精密称取葛根素对照品10mg,置10mL量瓶中加入不同的溶出介质适量,置超声仪中使完全溶解,加溶出介质至刻度,摇匀,制成质量浓度约为1.0gL-1的对照品储备液.
2.1.2空白肠灌流液的制备K-R液适量,按2.3项下方法灌流,收集流出液,即得.
2.1.3含药肠灌流液的制备称取葛根素原料药200mg,和不同比例的方中其他成分,加入10mLpH7.4的缓冲液于25mL具塞试管中,按2010年版药典凡例下溶解度的操作,每隔5min强力振摇30s,过滤后取续滤液用K-R液稀释得葛根素质量浓度为80mgL-1的灌流液.
2.2分析方法的建立
2.2.1色谱条件LunaC18色谱柱（4.6mm×250mm,5μm,Phenomenex,USA）,流速1.0mLmin-1,检测波长250nm,柱温30℃,进样量20μL,流动相：0.05%磷酸溶液-乙腈（82∶18）.
2.2.2标准曲线绘制精密移取2.1.1项对照品储备液0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL,定容至5mL得质量浓度为20,40,80,120,160,200mgL-1的系列对照品溶液,分别精密吸取各系列对照品溶液20μL注入高效液相色谱仪,记录峰面积.以质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标进行线性回归得其标准曲线y等于113923x-535665,R2等于0.9991.
2.2.3精密度试验取对照品灌流液于1d内HPLC重复测定6次考察日内精密度,取对照品灌流液,分别于第1,3,5天HPLC测定,考察日间精密度.日内精密度及日间精密度RSD均小于4%.2.2.4稳定性试验含药灌流液于0,2,4,6,8,12h不同时间点测定,计算峰面积,RSD小于2%.
2.2.5回收率考察精密吸取高、中、低3个浓度含药灌流液,每个浓度平行3份,各精密加入对照品灌流液,以测得浓度与实际浓度做比较计算方法回收率.方法回收率不低于80%.
2.3大鼠在体肠单向灌流实验
大鼠禁食不禁水18h,称重,10%水合氯醛麻醉.背位固定于实验台上,沿腹中线剪开腹部3～4cm,找到实验用肠段（空肠段离幽门15cm处开始）,进口端与注射泵相连,用预热至37℃的生理盐水5mLmin-1的速度对所取肠道进行冲洗.流速调为0.2mLmin-1,开始灌流药液,约30min后吸收达到稳定状态.开始计时,用已知质量的小瓶在出口处每隔15min收集1次,计算收集前后小瓶质量称量差,同时测定收集液的密度,以此方法来进行灌流液的体积校正.实验结束后处死大鼠并剪下被灌流的肠段,测量其长度和内径.HPLC测定不同时间段流出药液中指标性成分.采用重量法校正水分吸收,按文献计算有效渗透系数、肠吸收速率常数和肠吸收分数[11].
大学生如何写生物药剂学论文
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Peff等于-Qinln（Cout（cor）/Cin）2πrL
Ka等于（1-Cout（cor）CinQinV）
Fa等于（1-Cout（cor）Cin）×100%
Cout（cor）等于CoutQoutQin
Qout等于Mout/Doutt
Qin是灌流液流速（mLmin-1）,L（cm）是灌流肠段长度,r（cm）是灌流肠段半径,Cin（mgL-1）是灌流液葛根素初始浓度,Cout（cor）（mgL-1）是经重量法校正后的灌流收集液葛根素浓度,V等于πr2L是灌流肠道体积（mL）,Qout（mLmin-1）是通过灌流液密度测定的流出流速,Cout（mgL-1）灌流收集液葛根素浓度,Mout（g）灌流收集液质量,Dout（gmL-1）灌流收集液密度,t（min）取样周期.
3结果
3.12个成分混合溶液对葛根素吸收影响
在葛根素灌流液中分别加入不同比例黄芩苷、甘草酸或盐酸小檗碱,按2.3项下操作进行实验其结果见表1.不同比例的黄芩苷、甘草酸和小檗碱对葛根素吸收情况均有一定的影响.从Fa来看,10%小檗碱使葛根素的Fa下降较多,100%的黄芩苷对葛根素的Fa增加较多,不同浓度的甘草酸均使葛根素的Fa下降明显.加入不同比例的各组分对葛根素Ka均有一定的影响,10%小檗碱使葛根素Ka最小,数据为0.539×10-4s-1,100%的小檗碱使葛根素的Ka增加较多,数据为2.278×10-4s-1.10%小檗碱不仅使葛根素的Ka达到最小,而且使葛根素的Fa最低,100%黄芩苷使葛根素的吸收分数达到最大,但是与其不同的是,100%的小檗碱使葛根素的Ka达到最大.
3.23个成分混合
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