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摘 要 作为检测蛋白质纯度的方法,SDS-PAGE(十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳)出现在生物技术实践课程中.与其它选修实验相比,SDS-PAGE步骤繁琐,人力物力投入大,而且具有安全隐患.针对以上问题,笔者提出了SDS-PAGE的“三个联系”,以期利用有限的教学时间,使学生的收获达到最大化.
关 键 词 电泳蛋白质 流程 生物技术
中图分类号 G633.91 文献标识码 B
1 SDS-PAGE教学的主要问题
对于高中生而言,SDS-PAGE实验教学的难度很大,主要体现在三个方面.
1.1 实验的复杂性
本实验是一个庞大的操作流程,由若干个重要环节组成,如电泳槽的组装、样品的变性处理、灌制分离胶与浓缩胶、样品的加入、电路的控制、电泳图谱的显色、分子量的计算等,每一个环节都是一个比较复杂的、独立的实验技术.高中生必须具备良好的实验操作功底,才能独立地完成该实验.
1.2 安全保障
本实验技术用到了丙烯酰胺(Acr)和N,N-甲叉双丙烯酰胺(简称Bis)两种剧毒药品,其他药品也对人体具有不同程度的伤害作用(如注意防止SDS吸入).从目前高中生的实验技能水平来看,对上述有毒物品操作与防护,难度极大,稍有忽视,就可能会影响师生的健康.
1.3 不作为考试重点出现
SDS-PAGE实验本身内容多、难度高,但不作为高考重点难点出现,在一定程度上会影响教师的备课热情与学生的学习兴趣.
2 SDS-PAGE教学的“三个联系”
基于上述三个问题,笔者建议,SDS-PAGE实验教学应该做到“三个联系”,以期用有限的课时,达到教学内容的最优化.
2.1 对于电泳技术本身,要和其他电泳技术的联系
这方面的联系,分为横向与纵向两类.前者是不同学科、不同研究领域中电泳技术的变化与共性,而后者则是SDS-PAGE在蛋白质分析中按照一定的技术要求所作的一系列改进,示意图如图1所示.
图1所示的电泳技术拓展图,其实是一幅电泳技术的思维导图.在教学当中,教师可以根据个人的知识背景及教学需要,在横、纵两个方向上进行延伸.这样,学生不但能够了解更多的电泳技术,而且能够从众多的电泳技术中了解到该技术的原理及应用价值,这种从众多事实当中提取的概念.亦即,学生不会因为过多地学习各种各样的电泳技术而感到疲劳、乏味、难于吸收,相反,他们会从中提炼电泳的共性:带电粒子在电场中的运动.从这一点出发,按照不同的实验要求(如提高实验速度、增大蛋白质承载量等)或研究领域(蛋白质、核酸甚至化学领域),而对基本的电泳实验体系进行优化、改造,就形成了新的技术.如图1中的“阴离子电泳”,其实是浙江版高中生物教材的蛋白质电泳实验教学内容;利用概念图找到各种电泳技术之间的联系与区别,使学生能够看到不同技术中的共性的、本质的特征,比孤立地学习各个技术更有效、更有用.这种由具体的电泳技术(如SDS-PAGE)出发,提炼出抽象的、具有普遍意义的电泳概念,再根据具体的应用领域与实验要求在这一概念中加入具体的修饰、限制条件,就构成了新的、与最初所学电泳技术相关的、新的实验技术.这种“具体――抽象――具体等”的“学习环”式的教学方法,其本质就是知识于技能的正迁移.学生一旦进入这个无穷无尽的“学习环”,将会受益终身.
2.2 对于电泳技术的原理及应用,要和其他在概念层面相关的技术相联系
从教材中可以看到,电泳技术的实质有二,即利用某类物质(蛋白质、核酸等)的一个或多个性质(分子量、等电点、碱基数目等)的不同,利用一定的方法(电场等),将这类物质进行分离.由此,按照同一性质的不同表现程度来分离物质,可以列举一系列技术.蛋白质层析、纸层析(必修1中的“植物光合色素的提取”实验)以及化学当中广泛应用的各种色谱技术,都归于此类.这是将电泳技术上升到概念层面而产生的技术教学方法,将不同技术的共性抽提出来,通过SDS-PAGE的教学,将众多技术的概况展现在学生面前.这是一种极其高效的教学方法,即概念教学法.总体上,上述所有技术都可以成为“分离技术”,即利用溶解度、分子量、沸点等的不同,将某一混合物进行分离、提纯.从概念的层面上描述,所有的分离技术可被解释为:混合物各组分的某一性质在量上存在差异,通过一系列的技术手段,将这种差异表现出来.以SDS-PAGE为例,蛋白质样品构成一个混合物,其中所有的蛋白质都具有分子量,但各种蛋白质之间,分子量不同.因此,通过特定凝胶构成的“分子筛”就将各种蛋白质分离开来.又如离心技术,就是根据沉降系数的不同将大分子或细胞器分开的.
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对于高中学生而言,大多数人不会在将来的求学或工作当中接触科研工作,过于细致的科学教育对于这些学生来说是没有现实意义的.他们只需要知道众多技术(众多科学事实)的共性,对某一领域的概况有一定的了解,就能够起到提高科学素养进而提高工作与生活质量的效果.而对于少数有志于科研工作的学生而言,在高中阶段能够抓住众多科学事实、科研手段的共性,进而训练他们在任何学习过程中抓住任何一般性事实的共性的能力,将有利于优化他们的思维品质.
2.3 在SDS-PAGE实验教学中,与通用技术课程的主要思想相联系
SDS-PAGE实验操作复杂,且有剧毒药品,在教学中,必须由教师指导,多名(2人或以上)分工、分步骤进行.在分工、分步骤方面,教师不妨参照高中《通用技术》课程中关于“系统”、“流程”的内容.理科实验与《通用技术》课程的结合,是优化课程、提高课堂有效性的突破点之一.一方面,理科实验亟需规范化、科学化的指导;另一方面,《通用技术》虽然将工程技术的一般性规律提取出来,但在具体的教学过程中,又缺乏生动的载体,只能以“组装自行车”、“制作板凳”等为例进行教学,比较单一.其实,理科实验到处体现着通用技术的主要思想,系统与流程就是其中的典范.
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《通用技术》认为:
①活动或事件在其发展的过程中,依据某种特征或方式,可将该过程分解为若干个小过程,称这些小过程为环节;
②过程的经历中,各环节按照一定的时间顺序先后出现,完成.这种时间顺序关系,成为时序;
③具有以上两大特征(关键点)的过程,即若干环节随着时间的变化,依序完成的进程流,称为流程.
按照上述标准,SDS-PAGE完全可以按照流程的思想进行分工合作
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