基因工程类论文范文集,与土壤农杆菌在植物基因工程中的应用相关本科毕业论文

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摘 要土壤农杆菌介导的基因转移是目前最常用的获得转基因植物的方法,农杆菌的Ti质粒包括了复制原点、vir基因、冠瘿碱代谢基因和T－DNA区域.在土壤农杆菌的T－DNA的转移过程中起关键作用的物质和结构是：乙酰丁香酮、T－DNA的右边界、vir基因的诱导表达.

关 键 词土壤农杆茵　T－DNAvir基因　基因工程　克隆载体　乙酰丁香酮

中图分类号Q－49　文献标识码E

土壤农杆菌是一种植物病原菌,属根瘤菌科,为革兰氏阴性菌,它通过根部伤口侵入植物体,刺激植物在被侵入部位形成冠瘿瘤,引发根癌病.患病植株生长缓慢,严重时植株死亡.冠瘿瘤的形成是由于土壤农杆菌的Ti质粒上的一段DNA,转入植物细胞后,整合进植物的染色体上,进而干扰被侵染植物的正常生长,这段DNA被称为T－DNA.这种具有天然转基因功能的质粒,被改造后,可以用作基因转移的载体,实现目的基因导入到植物细胞中.

1　土壤农杆菌的Ti质粒

土壤农杆菌的质粒大小为200－250kb,包含有四个区域：复制原点、vir基因、冠瘿碱代谢基因和T－DNA区域,如图1所示.

1.1　T－DNA区域

T－DNA区域包含有一个生长素基因、细胞分裂素基因和冠瘿碱合成基因；这些基因都只有在T－DNA插入植物基因组后才能激活表达,其中生长素基因和细胞分裂素基因可以催化生长素和细胞分裂素的合成,调节植物细胞的生长和分裂,它们的过度表达会引起被侵染部位的植物组织过度生长,形成冠瘿瘤.冠瘿碱合成基因的表达可以在植物冠瘿瘤内催化冠瘿碱合成,冠瘿碱可以为土壤农杆菌的生长繁殖提供碳源和氮源.

T－DNA的两端分别有左边界和右边界的序列,右边界的序列包含一个25kb的重复序列,右边界的完整能保证T－DNA区域中任何基因都能完整地整合到植物基因组中,缺失实验表明,左边界的序列不参与整合过程.

1.2　vir基因

vir基因位于T－DNA以外的一个35kb的区域内,已发现有编码基因22－24个,这些基因都编码与T－DNA转移有关的蛋白质；vir基因的