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摘 要 目的:克隆人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase, hTERT)核心启动子,研究 hTERT 启动子在人胃癌细胞SGC7901 和正常人成纤维细胞 HLF中的转录活性.方法:以Hela 细胞的基因组DNA 为模板,PCR 扩增hTERT 核心启动子片段,将其克隆入荧光素酶报告基因质粒pGL3-Basic 构建hTERT-pGL3Basic 表达载体.将该载体用脂质体转染法转染 SGC7901和 HLF 细胞,检测hTERT 启动子在这两种细胞中的转录活性.结果:成功克隆 hTERT 核心启动子;双酶切和 PCR 鉴定均显示hTERT-pGL3Basic 表达载体构建成功;荧光素酶活性检测显示 hTERT 启动子在 SGC7901 细胞中的转录活性为阳性对照的21.5%,而在 HLF 细胞中无活性.结论:hTERT启动子具有肿瘤特异性,可以用于肿瘤的靶向基因治疗.
关 键 词 :人端粒酶逆转录酶启动子;克隆, 靶向基因治疗;胃癌
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