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郝宏党　陈晓琳　蔡　硕　蔡玉文

摘　要：电镜观察益肺饮诱导肺癌细胞凋亡.镜下可见：细胞凋亡分为早期阶段、中期阶段、凋亡小体形成阶段和晚期阶段(3期4阶段),其超微结构主要可见到细胞形态、胞浆、胞核、染色质的变化,及细胞凋亡的特异性标志――凋亡小体.提示：细胞凋亡多见孤立、分散的癌细胞.益肺饮可谤导肺癌细胞凋亡.

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关 键 词 ：TEM；益肺饮；细胞凋亡

中图分类号：11285.5

文献标识码：A 文章编号：1673－7717(2007)07－1390－02

研究中药诱导肿瘤细胞凋亡国内报道不多.笔者应用透射电镜(TEM)观察了中药益肺饮灌胃治疗接种Lewis肺癌株小鼠实体瘤,以血清药理法诱导A549人肺癌细胞株凋亡,现将其超微结构特征结果总结如下.

1　材料与方法

1．1 实体瘤组取瘤组织切成1mm3小块,投入2.5％戊二醛固定2h以上,漂洗后,1％锇酸固定1h,乙醇梯度脱水,EponS12树脂包理,超薄切片,铀铅双染色,TEM观察.

1．2瘤株组2.5％戊二醛培养瓶内原位固定2h以上,橡皮铲刮下细胞,放入离心管内,2000r/min离心15min,漂洗后,如上法固定,脱水、包埋、切片、染色、观察.

2　结　果

2．1 细胞凋亡初期阶段凋亡细胞与其周围细胞的间隙增宽,连接消失,体积缩小,电子密度增强.细胞表面微绒毛明显减少,胞浆内线粒体肿胀,粗面内质网扩张,表面核糖体脱落.胞核大,异染色质浓缩呈团块状,积聚在核的周边.细胞膜正常.

2．2细胞凋亡中期阶段除细胞膜外,其余细胞形态学变化均与初期阶段相同.该阶段,细胞膜变化尤为明显.胞膜表面呈数量不一、大小不等、电子密度适中的泡状膨出(发泡、长芽).此时,凋亡的细胞从癌巢中脱离,成为孤立

2．3凋亡小体形成阶段细胞破裂,形成单个或数个具有细胞凋亡的特异性结构――凋亡小体.

2．4细胞凋亡晚期阶段凋亡小体被其周围的吞噬细胞吞噬.

3　讨　论

细胞凋亡(1972“Kerr”命名)是一种具有特征形态改变(凋亡小体)的细胞死亡方式.镜下观察益肺饮诱导肺癌细胞凋亡,肺癌细胞凋亡初期阶段――中期阶段――凋亡小体形成阶段――晚期阶段多见孤立、分散的癌细胞.凋亡小体在癌株组呈圆形或椭圆形,体积较小；在实体瘤组呈不规则形,体积较大.调亡小体是凋亡细胞形态学特征性指标之一,明确凋亡小体的特征对于探讨凋