血浆类毕业论文开题报告,与头孢米诺的血药浓度检测技术相关经典论文范文

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[摘 要]目的 探讨人血浆中头孢米诺浓度的反相高效液相色谱法的检测.方法 高效液相色谱法,固定相为C18柱, pH4.5 醋酸铵缓冲液：甲醇（85：15） 为流动相, 扑热息痛为内标,检测波长273nm.结果 头孢米诺在 3.71～118.89μg/ ml 检测浓度范围内呈良好线性关系（r 等于0.9999） ； 高、中、低3 种浓度的日间RSD ≤4.90%、日内RSD ≤1.73%；平均回收率为74.58 %.最低检测限为3.49μg/ml.结论 方法简便、稳定、准确,适用于临床头孢米诺血药浓度的测定.

[关 键 词 ]头孢米诺 血药浓度 检测

中图分类号：S7 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2014）13-0350-01

头孢米诺（Cefminox Sodium） 为头霉素衍生物, 对β-内酰胺酶高度稳定, 对革兰阳性菌和革兰阴性菌有广谱抗菌活性,对呼吸系统及泌尿系统感染有较好的疗效, 且副作用较少.本文建立RP-HPLC谱法测定头孢米诺钠的血药浓度,专属性强,操作较简便,线性关系和精密度均好,结果准确.

1.材料

1.1 仪器

日本岛津液相色谱仪, LC-10AT 泵,SPD-10A 紫外检测器, SePu3000色谱工作站（杭州谱惠科技有限公司）.

1.2 试药

头孢米诺钠对照品（ 中国 药品生物制品检定所）,头孢米诺钠样品（海南思迈药业有限公司,批号040501）,扑热息痛原料（汕头金石制药总厂,批号060901） 甲醇（HPLC 级） ,冰醋酸（AR ）, 醋酸铵（AR ） , 三氯乙酸（AR）, 注射用水.

1.3 色谱条件

迪马C18柱（250mm×4.6mm,5μm）；流动相为pH4.5 醋酸铵缓冲液（醋酸铵7.7g, 加水溶解, 加冰醋酸6ml加水至1000ml） ∶甲醇（v：v等于85：15） , 内标溶液：1.0mg/ml扑热息痛流动相溶液； 流速1.0ml /min； 柱温：室温；检测波长： 273nm.测得头孢米诺空白血浆、标准品、内标品色谱图见图1.头孢米诺保留时间为8.5min,内标物扑热息痛保留时间为16.3min,头孢米诺、内标物与血浆内源物都得到良好的分离.

2 样品的预处理 取血浆200μl,加入内标40μl,振荡,加入10%三氯乙酸溶液100μl,旋涡混匀3min,以13000r/min的高速离心4min,取上清液20ul进样.

2.1 标准曲线的配制

2.1.1 标曲贮备溶液的配制 精密称取头孢米诺标准品10mg,加蒸馏水定溶于10ml容量瓶中,得到1.0mg/ml头孢米诺标准储备液.

2.1.2 内标溶液的配制 精密称取扑热息痛10mg,加少量甲醇溶解,加流动相稀释定容至10ml,作为内标储备液.准确的移取内标液1.00ml,置10ml量瓶中用流动相稀释至刻度,摇匀,即为内标溶液：1.0mg/ml.

2.1.3 血浆标准曲线的配制 以健康人空白血浆加头孢米诺标准液适量,配制成118.89μg/ml、59.44μg/ml、29.72μg/ml、14.86μg/ml、7.43μg/ml、3.72μg/ml的血浆标准溶液,按样品预处理项下操作,进行分析,以药物浓度对药物、内标峰面积比作线性回归,得回归方程为Y等于0.0219+0.0337C,r等于0.9999.头孢米诺钠在3.72μg/ml 118.89μg/ml的范围线性关系良好.血浆中的最低检测浓度为3.49μg/ml（S/N等于3）.

2.2 精密度试验

准确配制含头孢米诺浓度为118.89μg/ml、29.72μg/ml、7.43μg/ml的标准血浆样品,于同日内及连续3天按样品预处理方法操作,所得结果代入回归方程,分别 计算 日内及日间精密度.

2.3 提取回收率试验

准确配制含头孢米诺浓度为118.89μg/ml、29.72μg/ml、7.43μg/ml的标准血浆样品,按样品预处理方法操作,测得血浆标准溶液头孢米诺峰面积与内标峰面积比A1；另取一定量的头孢米诺钠标曲贮备溶液配制118.89μg/ml、29.72μg/ml、7.43μg/ml的系列标准溶液各5份以同体积进样,测得标准溶液头孢米诺峰面积与内标峰面积比A2.回收率等于A1/A2×100% 计算 提取回收率,平均回收率为74.58%.

2.4 稳定性试验

2.4.1 室温稳定性 准确配制含头孢米诺浓度为118.88μg/ml、29.72μg/ml、7.43μg/ml的标准血浆样品,于室温下放置0、2、4、6、24h后按样品预处理方法操作,与0h所测定的浓度相比较,求其偏差.结果表明血浆样品在24h内保持稳定,偏差在-4.95%～2.89%之间.

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2.4.2 冻融稳定性 准确配制含头孢米诺浓度为118.88μg/ml、29.72μg/ml、7.43μg/ml的标准血浆样品,于-20℃冷冻24h,取出待完全溶解后按样品预处理方法操作,反复冻融3次,与未冻前相比较,求其偏差,结果表明标准血浆样品冻融条件下可保持稳定,偏差在-2.14%～3.19%内.

2.4.3 长期稳定性 准确配制含头孢米诺浓度为118.88μg/ml、29.72μg/ml、7.43μg/ml的标准血浆样品,于-20℃冷冻0、7、14、21天后取出待融完后按样品预处理方法操作,与0天相比较,求其偏差,结