本论文是一篇统计学相关论文网,关于山东大学学报医学版文模板相关毕业论文提纲范文。免费优秀的关于统计学及神经系统及结肠方面论文范文资料,适合统计学论文写作的大学硕士及本科毕业论文开题报告范文和学术职称论文参考文献下载。
脑源性神经营养因子对小鼠回肠及结肠平滑肌收缩活动的影响及其机制
陈飞雪,于岩波,王鹏,左秀丽,李延青
(山东大学齐鲁医院消化内科,济南250012)
摘 要:目的观察不同浓度脑源性神经营养因子(BDNF)对小鼠离体回肠和结肠平滑肌肌条收缩活动的影响,探讨蛋白酪氨酸TrkB)-磷脂酶C(PLC)/三磷酸肌醇(IP3)信号通路在BDNF影响肠道平滑肌收缩过程中的作用.方法制备小鼠回肠,近端结肠和远端结肠平滑肌纵肌条观察不同浓度BDNF(1×10-81×10-7mol/L)对小鼠离体肠道肌条收缩活性的影响,并分别观察TrkB抗体,新霉素及肝素种TrkB-PLC/IP3信号通路阻滞剂孵育肌条后,BDNF对肌条收缩活动的影响.结果BDNF(1×10-81×10-7mol/L)对小鼠回肠和结肠平滑肌离体肌条的收缩具有明显的兴奋效应,(P<,0.05).TrkB抗体新霉素及肝素明显BDNF(1×10-7mol/L)对肌条收缩的兴奋作用,其张力效应值与对照组相比均有统计学意义(P<,0.05).结论BDNF兴奋小鼠肠道平滑肌肌条的收缩活动TrkB-PLC/IP3信号通路在BDNF影响肠动力过程中发挥重要作用关 键 词脑源性神经营养因子,信号通路,平滑肌,收缩,小鼠中图分类号:R574文献标码:ABrain-derivedneurotrophicfactorinfluencescontractileactivityintheisolatedileumandcolonofmice
CHENFei-xue,YUYan-bo,WANGPeng,ZUOXiu-li,LIYan-qing
(DepartmentofGastroenterology,QiluHospitalofShandongUniversity,Jinan250012,China)
Abstract:ObjectiveToelucidatethedirecteffectsofbrain-derivedneurotrophicfactor(BDNF)oncontractionofmiceintestinalmusclestripsandtoinvestigatewhethertheeffectofBDNFonintestinalcontractionismediatedthroughthetyrosinekinasereceptorB(TrkB)-phospholipaseC(PLC)/inositoltriphosphate(IP3)pathway.MethodsLongitudinalmuscle(LM)stripsofileum,proximalcolonanddistalcolonfromC57bl/6micewereprepared.ThecontractionofLMwasrecordedwithtensiontransducer.ToinvestigatethecontractileeffectsofBDNFonLMstrips,twodifferentdosesofBDNF(1×10-8and1×10-7mol/L)wereaddedtothemusclestrips.ToinvestigatetheeffectsofantagonistsofTrkB-PLC/IP3signalpathwayonthecontractionofmusclestripsinducedbyBDNF,LMstripswerepretreatedwithTrkB(1×10-8mol/L),neomycin(1×10-5mol/L)andheparin(1×10-5mol/L)beforeadministrationofBDNF.ResultsBDNFexcitedthecontractionofLMfrommiceileum,proximalcolonanddistalcolon(P<,0.05)ofmice.PretreatmentwithTrkB(1×10-8mol/L),neomycin(1×10-5mol/L)andheparin(1×10-5mol/L)dramaticallyattenuatedtheexcitatoryeffectsofBDNF(10-7mol/L)onthecontractionsofLMstrips(P<,0.05).ConclusionBDNFexcitesthecontractionofmiceintestinalmusclestrips,andtheantagonistsofTrkB-PLC/IP3signalpathwayattenuatestheexcitatoryeffectsofBDNF,whichhighlightstheimportantroleofBDNFandTrkB-PLC/IP3signalpathwayinpromotingthegutmotility.
Keywords:Brain-derivedneurotrophicfactor,Signalpathway,Smoothmuscle,Contraction,Mice
作为神经营养物质家族中的一员,脑源性神经营养因子(rain-derivedneurotrophicfactor,BDNF)对肠道感觉的调节作用已被大量研究,近年发现其对肠道动力亦发挥着重要的调节作用.临床研究表明BDNF可以加快健康成人或外周神经病变患者的肠道排空增加排便频率[1-],在调节肠道动力过程中发挥着重要的作用,但目前尚BDNF对肠动力调节作用系统性研究.在中枢神经系统,BDNF与蛋白酪氨tyrosinekinasereceptorB,TrkB)结合后激活磷脂酶C(phospholipaseCPLC)/三磷酸肌醇(nositoltriphosphate,IP3)信号传导途径进而使胞内的钙离子浓度升高,增强神经肌肉接头突触兴奋性神经传导[-5],提示BDNF可能通过与中枢作用相似的机制,发挥其对肠动力的调节作用.本研究运用离体平滑肌肌条动力测定技术,观察不同浓度BDNF对小鼠离体回肠和结肠平滑肌肌条收缩活动的影响TrkB-PLC/IP3信号通路在BDNF影响肠道平滑肌收缩过程中的作用.实验动物健康成年雄性C57Bl/6小鼠40只,体20～25g,由山东大学医学院神经生物学研究所提供.
BDNF购于美国Peprotech公司抗-TrkB抗体购自美国Sigma公司新霉素(PLC阻滞剂)和肝素(IP3阻滞剂)购自山东大学齐鲁医院.以上试剂均溶于0.9%的生理盐水溶液中.Kreb's液组成:NaCl120.6KCl5.9,MgCl21.2,CaCl22.5,KH2PO41.2,NaHCO315.4,D-glucose11.5.每次实验前用蒸馏水新鲜配制持续供给95%O2和5%CO2的混合气体pH保持在7.14.主要仪器设备ZH-Z离体器官测量系统(淮北正华生物仪器设备有限公司)JH-2B张力换能器(北京航天医学工程研究所)麦氏(Magnus)浴槽及SMUP-PC生物信号处理系统(上海嘉龙教学仪器厂)离体肌条制备小鼠禁食不禁水12h,颈椎脱臼处死,开腹,迅速取出近端结肠约2cm,远端结肠约2cm(距肛门0.5cm)和回肠约2cm,放置于4℃Kerb's液中.沿肠系膜剪开肠管,小心去除黏膜,与肠管平行方向取纵肌肌条(8mm×3mm).将各肌条分别置于灌流肌槽中,每个肌槽均盛有5m37℃Kerb's液并持续供给95%O2和5%CO2的混合气体.肌条的一端固定在肌槽底部的玻璃挂钩上,另一端连接张力换能器,通过生物信号处理系统记录和分析肌肉收缩活动的张力变化.对肌条施加0.5g预初张力,平衡3040min(每隔10min用新鲜37℃Kerb's液冲洗肌条),以肌条自发性收缩稳定时为平衡标准.实验步骤①BDNF对小鼠肠道平滑肌肌条的作用:以为空白对照,待为1×10-8mol/L和1×10-7mol/L,每种浓度观察记录20min.更换BDNF浓度前先用37℃Kerb's液冲洗肌条3次,每次间隔10min,待肌条自发收缩恢复到原来平衡状态后,再加下一药物②TrkB-PLC/IP3信号通路阻滞剂对BDNF作用的影响:以BDNF(1×10-7mol/L)为对照待肌条平衡后分别向不同的灌流槽中加入TrkB抗体10μL,新霉素15μL及肝素12μL,使其终浓度分别为1×10-8mol/L,1×10-5mol/L及1×10-5mol/L.TrkB抗体孵育肌条60min后加入BDNF(1×10-7mol/L)新霉素肝素分别孵育肌条20min后加入BDNF(1×10-7mol/L),观察记录20min.
观察指标取加入BDNF前10min的肌条运动的平均张力为基础值,加入BDNF后20min内的平均张力为效应值(R即BDNF加入前后肌条收缩振幅的变化程度),R作为BDNF对肌条运动影响的指标.
1.3统计学处理采用SPSS16.0软件进行统计分析,数据以表示采用组间各浓度的差异t检验比较同一浓度不同预处理的差异P<,0.05为差异有统计学意义.不同浓度BDNF对小鼠回肠和结肠平滑肌肌条收缩活动的影响回肠肌条与空白对照组比较,1×10-8mol/LBDNF可以增强肌条的收缩振幅,(1.06±0.031.00±0.01,P>,0.05).1×10-7mol/LBDNF
统计学相关论文范文参考文献,与山东大学学报医学版文模板相关论文网参考文献资料：
13888888888
点击咨询 