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摘 要 目的:研究抗菌肽PekⅡ基因在大肠杆菌中的融合表达并初步纯化.方法:根据大肠杆菌密码子的偏好性,人工设计并合成2段核苷酸序列,退火获得PekⅡ基因;将此基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中,构建成抗菌肽基因PekⅡ融合表达载体pGEX-PekⅡ,转化至大肠杆菌BL21中,用IPTG进行诱导.取超声破碎后的上清经Glutathione SepharoseTM4亲和层析得到纯化融合蛋白.结果:PCR和测序表明已获得正确PekⅡ编码基因,SDS-PAGE显示29kD处有特异性的蛋白条带出现,纯化得到的GST-PekⅡ经MALDI-TQF MS分析得出其相对分子质量为29553.03.结论:抗菌肽PekⅡ基因在大肠杆菌中的融合表达获得成功,初步纯化得到纯品.
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关 键 词 :抗菌肽;大肠杆菌;融合蛋白;表达
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中图分类号:R78,R916 文献标识码:A 文章编号:1673-6273(2009)04-676-03