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摘 要 :目的:探讨HBsAg携带者HBV-DNA与血清HBV免疫标志物的关系,为临床诊治提供更准确的依据.
方法:选取300例HBsAg携带者,检测定量检测HBV-DNA和血清HBV免疫标志物.
结果:性别之间HBV-DNA检测结果阳性率差异无统计学意义(P>0.05).大三阳及HBsAg(+)、HBeAg(+)者HBV-DNA阳性率及定量平均值均显著高于其他模式患者,差异有显著性(P<0.05).HBeAg(+)者HBV-DNA阳性率高于HBeAg(-)者,差异有显著性(P<0.05).
结论:定量检测HBV-DNA较HBV血清免疫标志物更准确反映HBV的存在、复制状态以及传染性的大小,为临床诊治提供重要依据.
关 键 词 :乙型肝炎病毒 HBV-DNA HBV免疫标志物 HBsAg携带者
【中图分类号】R-1 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801(2013)10-0561-01
1.资料与方法
1.1 研究对象.2010年6月~2013年6月,收集在我疾控中心检查确诊为HBsAg携带者300例,其中男187例、女113例,年龄18~59周岁,平均(32.45±7.03)岁.患者均排除丙型肝炎病毒、酒精及药物等因素所致的肝损害,以及2周内应用抗病毒药物、1个月内应用激素或免疫抑制剂等患者.
1.2 标本采集.所有患者均于空腹清晨8时抽血,采集静脉血5ml,进行HBV血清标志物及HBV-DNA定量检测.
1.3 HBV血清标志物检测.采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb及HBcAb,试剂盒由上海阿尔法生物技术有限公司生产,仪器使用上海科华KHB-ST-360酶标仪,DEM-Ⅲ型自动酶标洗板机,严格按照试
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1.4 HBV-DNA定量检测.HBV-DNA采用荧光定量PCR方法检测,结果以>103copies/ml为判定阳性的标准,DA-7600实时荧光定量PCR仪及试剂盒均由中山大学达安基因股份有限公司生产,操作步骤严格按照说明书进行.
1.5 统计学处理.采用SPSS11.5软件进行数据统计分析,率的比较采用X2检验,计量资料比较采用t检验,以P≤0.05时为差异有显著性.
2.结果
2.1 性别分布.300例HBsAg携带者HBV-DNA检测结果阳性186例,阳性率62.00%;其中男122例,阳性率65.24%(122/187);女64例,阳性率56.64%(64/113),性别之间HBV-DNA检测结果阳性率差异无统计学意义(P>0.05).
2.2 HBsAg携带者HBV血清标志物模式与HBV-DNA检测结果.大三阳(HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性者)及HBsAg(+)、HBeAg(+)患者HBV-DNA阳性率及定量平均值均显著高于其他模式患者,差异有显著性(P<0.05).HBeAg(+)共146例,其中HBV-DNA阳性143例,阳性率为97.95%;HBeAg(-)共154例,其中HBV-DNA阳性43例,阳性率为27.92%,二者阳性率比较差异有显著性(P<0.05),见表1.
3.讨论
HBV血清免疫学标志物传统的检测方法是ELISA法,该法简便易行,检测结果能够较为准确地反映机体对HBV的免疫反应状态,基本上能满足临床诊断的需要.该法实际检测的是机体对HBV的免疫应答状态,并不能够量化反映HBV的存在状态和复制情况,有一定的局限性,并且敏感性及特异性较低[2].近年来,随着分子生物学技术和聚合酶链式反应(PCR)技术的发展与成熟,在临床上得到广泛应用.有文献报道,采用定量PCR技术检测HBV-DNA,具有灵敏度高、特异性好,能够准确把握HBV的复制水平、病程变化、治疗恢复情况以及准确判定血清有无感染等状况[3].我们对300例HBsAg携带者HBV-DNA定量检测结果与血清HBV免疫标志物进行分析,结果显示,大三阳及HBsAg(+)、HBeAg(+)者HBV-DNA阳性率及定量平均值均显著高于其他模式者,表明此两种模式HBsAg携带者体内HBV复制活跃,具有很强的传染性.HBeAg(+)者HBV-DNA阳性率高于HBeAg(-)者,表明HBeAg阳性与HBV-DNA定量检测结果明显相关.虽然HBeAg作为HBV复制的标志物具有较好的灵敏度及较高的特异性,能反映体内HBV复制增殖水平[4],但是HBeAg的阳性也不能绝对代表HBV病毒在肝细胞的复制水平,如大三阳者HBV-DNA定量检测中仍然有2.34%的标本为阴性,可能原因为HBeAg阳性者体内病毒低水平复制,导致HBV-DNA定量检测结果为阴性.HBsAg阴性的小三阳及其他一些模式下也检测到HBV的复制,所以当患者血液中HBeAg消失并不能代表病毒已经停止了复制,可能是复制水平低而已.总之,定量检测HBsAg携带者HBV-DNA能够直接反映HBV的存在、复制状态以及传染性的大小,可以动态判断患者病情变化,值得临床推广应用.
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参考文献
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